BTN70604 miRNA PAGE胶回收试剂盒

miRNA PAGE胶回收试剂盒说明书
产品编号：BTN70604
规格：40T
产品及特点：
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离100 nt以下的小片段RNA，尤其是20nt左右的microRNA (miRNA)分子的主要方法，但是目前市场上用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少，为此百奥莱博开发了本产品。它具有下列特点:
1. 可以回收15-3000 nt范围内的各种长度的RNA，包括100 nt以下的miRNA片段。
2. 溶液A中含有百奥莱博RNA助沉剂RNADOWN，使miRNA回收率达到90%左右，3000nt的RNA的回收率达到30%左右。
3. 一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
4. 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5. 试剂盒含百奥莱博独特的固相RNase清除剂，可清除工作环境中RNase的污染。
6. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	20ml
溶液B	40ml
溶液C	40ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输， 4℃保存，保存期为一年。
自备试剂：
PAGE 试剂，RNA染料。
使用方法：
1. 用自备的固相RNase 清除剂对实验所需要的物品进行处理（见固相RNase 清除剂使用手册）。
2. 对RNA 样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。
3. 电泳结束后用EB 或其他染料染色并确定目标RNA 条带的位置。
4. 用干净的刀片切下目的条带，置于1.5mL 塑料离心管或其他合适的塑料容器中。
5. 用吸头挤压凝胶块到芝麻大小。
6. 加入1～2 倍体积的溶液A，一般的条带加0.5 mL 即可。
7. 在摇床上室温摇晃3-5 小时（小于500nt 的片段）或12-24 小时（对1000nt以上的片段）。
8. 13000-15000g室温离心10 分钟，转移上清到新的离心管。
9. 加入2 倍体积的溶液B。注意：溶液B 有沉淀，属于正常现象，用前摇晃均匀即可。
10. 上下颠倒混匀后13000-15000 g 室温离心20-30 分钟。
11. 小心用移液枪弃上清，回收的RNA 在管底离心面形成细小白色沉淀，注意不要吸弃此沉淀。
12. 加1mL 溶液C 到洗RNA 沉淀，颠倒摇晃数次后13000-15000g室温离心5分钟。
13. 小心弃上清，短暂离心半分钟，吸尽残留的液体。
14. 将RNA 样品溶于适量的自备的RNase-free 水中或直接溶解在后续反应的反应液中，立即使用或放-70℃保存。
注意：也可以另购液相RNase 清除剂代替RNase-free 水，因为前者能抑制残留的RNase 而RNase-free 水没有此功能。液相RNase 清除剂与RNA 的后续反应（如RT-PCR）兼容。