BTN71002 凝固血液DNA提取试剂盒

凝固血液DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN71002
规格：30T/100T
产品及特点：
凝固血液DNA提取试剂盒是百奥莱博自主开发的专门提取新鲜或冷冻凝固血液基因组DNA 的试剂盒。本产品具有下列特点:
1.DNA 纯净，OD260/280 在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等。提取得到的DNA 大小在30-50Kb之间。
2.每mL 新鲜凝固全血DNA 产量为20-50μg左右，每mL冻存的凝固全血DNA产量为2-10μg左右。
3.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
4.操作快速，整个过程在30分钟内即可完成。
规格及成分：

成分	30T	100T
溶液A	15ml	50ml
溶液B	15ml	50ml
说明书	1份	1份

保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：
氯仿、异丙醇、75%乙醇。
使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.5 mL 加入到10-15mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取新鲜凝固血液组织0.5 g 左右(如果是干的血块，只需要50 mg 左右并需要剪成微小的碎片)，加入到上步的溶液A 中匀浆，直到。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5 分钟，然后将匀浆液(包括凝固血液碎片)全部转移到新的1.5 mL 塑料离心管中。
4. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，将上清转移到新的1.5 mL塑料离心管中(上清液的体积一般为300 μL 左右)。
5. 在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5 分钟。
6. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，转移上清到新的1.5 mL 塑料离心管中。
7. 加入0.2 mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
8. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新的1.5 mL 塑料离心管中。
9. 重复7-8 步一次。
10. 加入1 倍体积的异丙醇(自备)，上下颠倒30秒混匀，12000-15000 g 离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA 沉淀。
11. 沉淀用75%乙醇清洗2 次后，室温晾干。
12. 加入50-100 μL 自备TE 溶解DNA 沉淀。DNA 即可用于电泳，酶切和PCR等反应。