BTN71204 柱式凝固血液DNA提取试剂盒

柱式凝固血液DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN71204
规格：50T
产品及特点：
本产品是凝固血液DNA提取试剂盒（BTN71002）的升级产品，专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组DNA。跟凝固血液DNA提取试剂盒相比，它具有下列特点:
1. DNA更加纯净，OD260/280在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作更加简单快捷，比凝固血液DNA提取试剂盒快十分钟以上。
3. 每克新鲜凝固全血DNA产量为20-50μg DNA。
4. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂：
氯仿
使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取1mL到10mL或15 mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2. 称取凝固血液0.1-0.5 g，加入到预热的溶液A中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。注意：如果是干的血块，用量不要超过0.2g，但需将干血块剪成微小的碎片。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟，然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。注意：尽量不要转移凝固血液碎片。
4. 在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5分钟。
5. 12000-15000g室温离心3分钟，将上清液转移到新的1.5 mL离心管中。
注意：如果上清液呈红色，属于正常现象。
6. 加入0.2 mL的自备氯仿，震荡器上充分振荡30 秒混匀。
7. 12000-15000 g 室温离心3 分钟，两相交界面将有白色膜状物。将不超过0.6mL 的上清液小心转移到新的1.5 mL 离心管中。
8. 加入1.5 倍体积的溶液C，上下颠倒30 秒混匀后分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要12000-15000 g 离心半分钟并弃穿透液。
9. 在离心吸附柱中加入0.7 mL 的通用洗柱液，12000-15000 g 离心半分钟。
10. 在离心吸附柱中加入0.3 mL 的通用洗柱液，12000-15000 g 离心半分钟（此步为第二次洗涤，一般可以省略）。
11. 12000-15000 g 离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意：此步不能省略，否则残留的通用洗柱液会影响DNA 的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中， 加入100 uL 通用洗脱液，12000-15000 g 离心半分钟，管底溶液即DNA 溶液，可立即使用或放冰箱长期保存。