BTN80203 柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒

柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒说明书
产品编号：BTN80203
规格：50T
产品及特点：
本产品是miRNA 聚丙烯酰胺凝胶回收产 miRNABACK (BTN70604)的柱式升级产品，可用于回收 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的microRNA(miRNA)分子。它具有下列特点:
1. 可以回收 15-3000nt 范围内的各种长度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA片段。
2. 柱式回收法，比沉淀法更见简单快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4. 一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
5. 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	15ml
溶液B	15ml
溶液C	15ml
溶液D	40ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液最好 4℃保存)，有效期一年。
自备试剂：
PAGE胶。
使用方法：
1. 切取含 miRNA片段的 PAGE 凝胶（100 mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入 1.5 mL塑料离心管中，用移液枪头尽可能将其捣碎（最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎），捣得越细越好。
2. 加入 300μL溶液 A。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃3小时以让 miRNA 从 PAGE 凝胶中扩散出来。
如果回收的 RNA 片段长度超过 100 nt，摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃，RNA 扩散速度会增加。
4. 12000-15000g室温离心 1-2分钟，将含RNA的上清液转移到一个新的5mL的塑料离心管中。
5. 加入 300μL 溶液 B、300μL 溶液C和750μL溶液D混合均匀将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置3分钟，然后再12000-15000 g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。
6. 加入700μL通用洗柱液于离心吸附柱中。12000-15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
7. 12000-15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
8. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管（自备）中，加入25-50μL RNA洗脱液，静置3分钟。
9. 12000-15000g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的miRNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
10. 可以PAGE电泳检查回收效率，最好使用百奥莱博的高灵敏的超快核酸银染试剂（BTN81104）染色以节约miRNA样品的用量。