BTN80923 大提柱式动物DNA提取试剂盒

大提柱式动物DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN80923
规格：4T
产品及特点：
本产品本产品在柱式动物DNA提取试剂盒（BTN71206）基础上改良而得的大提升级产品，主要用于大量快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。跟柱式动物DNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1. 处理量是柱式动物DNA提取试剂盒的10-20 倍。
2. DNA 纯净，大多数DNA 样品的OD260/280 值在1.8-1.9之间，无可见的RNA污染，可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
3. DNA 产率一般在0.5-2 mg/g（具体跟组织有关）。
4. 快速，整个过程室温操作约需20 分钟。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
大提离心吸附柱	4套
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输及保存、有效期一年。
自备试剂：
氯仿（也可省略，但产量会降低）。
使用方法：
1. 溶液A 和溶液B 在放置在4℃放置可能会产生沉淀，用前需要在65℃水浴中加热直到沉淀全部溶解，用前还需要充分摇匀。
2. 估算组织细胞的用量。每次大量提取一般需要1-5g 动物组织、剪切成小块。
3. 先将剪切成小块的动物组织，放入50mL 塑料离心管中，加入25mL 溶液A，然后用匀浆器匀浆。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。
4. 65℃保温5 分钟。
5. 12000-15000 g 室温离心3-5 分钟。
6. 小心将上清液转移到一新的50mL 塑料离心管中。
注意：下面第7-9 步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第10 步，但DNA 的产量会低30%左右，OD260/280不受影响。
7. 加入5mL 的自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30 秒。
8. 12000-15000 g 室温离心3-5 分钟。
9. 小心将上清液转移到一新的离心管中。
10. 加入等体积的溶液B，充分混匀。
11. 一次或分两次上柱，每次上柱后室温放置2 分钟。12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
12. 加25 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。
13. 重复上步一次。
14. 12000-15000 g 室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的50mL 塑料离心管中，加入1mL 通用洗脱液。
16. 室温放置离心吸附柱1-2 分钟。
17. 12000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。