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BTN80925 大提柱式植物DNA提取试剂盒
发布时间：2017-09-30 21:06 | 点击次数：293
大提柱式植物DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN80925
规格：4T
产品及特点：
本产品在柱式植物DNA提取试剂盒（BTN60602）基础上改良而得的大提升级产品，主要用于大量快速从各种植物组织中提取基因组DNA。跟柱式植物DNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.处理量大，一次可以处理1-3克植物组织。
2.纯度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂，得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
3.产率一般在30-260 μg/g样品。离心吸附柱最大吸附量为800μg。
4.DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。
5.适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。
6.不会发生离心柱堵塞现象。
规格及成分：
保存条件：
常温运输和保存，RNase A溶液长期放置需放在-20℃，有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
1.先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要2-4 g植物叶片、或1-2 g植物种子、或4-10 g植物果实。
3.先将新鲜植物组织剪切成小块，放入50 mL塑料离心管中，加入10 mL溶液A，然后用Polytron匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入10 mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
4.将匀浆物或砚磨物全部转移至干净的50 mL塑料离心管中。
5.在离心管中加入5 mL的溶液B，轻柔颠倒混匀后65℃水浴30-60分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
6.和5 mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7.室温5000-7000 rpm离心10-15分钟，两相间将有约5-15毫米厚的细胞破碎物。
8.将上清液(约15 mL)转移到一个干净的50 mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下微量上清液不取。
9.在装有上清液的离心管中加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
10.将一半的溶液转移到大提离心吸附柱中，室温放置2-5分钟，5000-7000 rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
11.将剩下的一半溶液转移到同一大提离心吸附柱中，室温放置2-5分钟，5000-7000 rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
12.加10 mL通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。
13.加10 mL通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。
14.室温离心1分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响DNA的使用。
15.将离心吸附柱转移到一个干净的50 mL离心管中，加入0.5-1 mL DNA洗脱液2.0，室温放置5-10分钟。
16.5000-7000 rpm室温离心1分钟，离心管中溶液即为DNA样品。
17.可以重复14-15步2-3次，以洗脱更多的DNA，天泽的大提离心吸附柱第二次和第三次洗脱仍可洗脱出大量DNA。
18.DNA可以立即使用或者放-20℃长期放置。
产品编号：BTN80925
规格：4T
产品及特点：
本产品在柱式植物DNA提取试剂盒（BTN60602）基础上改良而得的大提升级产品，主要用于大量快速从各种植物组织中提取基因组DNA。跟柱式植物DNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1.处理量大，一次可以处理1-3克植物组织。
2.纯度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂，得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、 real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
3.产率一般在30-260 μg/g样品。离心吸附柱最大吸附量为800μg。
4.DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。
5.适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。
6.不会发生离心柱堵塞现象。
规格及成分：
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 60ml |
| RNase A溶液（10mg/mL） | 1.5ml |
| 大提离心吸附柱 | 4套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
常温运输和保存，RNase A溶液长期放置需放在-20℃，有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
1.先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要2-4 g植物叶片、或1-2 g植物种子、或4-10 g植物果实。
3.先将新鲜植物组织剪切成小块，放入50 mL塑料离心管中，加入10 mL溶液A，然后用Polytron匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入10 mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
4.将匀浆物或砚磨物全部转移至干净的50 mL塑料离心管中。
5.在离心管中加入5 mL的溶液B，轻柔颠倒混匀后65℃水浴30-60分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
6.和5 mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7.室温5000-7000 rpm离心10-15分钟，两相间将有约5-15毫米厚的细胞破碎物。
8.将上清液(约15 mL)转移到一个干净的50 mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下微量上清液不取。
9.在装有上清液的离心管中加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
10.将一半的溶液转移到大提离心吸附柱中，室温放置2-5分钟，5000-7000 rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
11.将剩下的一半溶液转移到同一大提离心吸附柱中，室温放置2-5分钟，5000-7000 rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
12.加10 mL通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。
13.加10 mL通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。
14.室温离心1分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响DNA的使用。
15.将离心吸附柱转移到一个干净的50 mL离心管中，加入0.5-1 mL DNA洗脱液2.0，室温放置5-10分钟。
16.5000-7000 rpm室温离心1分钟，离心管中溶液即为DNA样品。
17.可以重复14-15步2-3次，以洗脱更多的DNA，天泽的大提离心吸附柱第二次和第三次洗脱仍可洗脱出大量DNA。
18.DNA可以立即使用或者放-20℃长期放置。