BTN80926 大提柱式真菌DNA提取试剂盒

大提柱式真菌DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN80926
规格：4T
产品及特点：
本产品在柱式真菌DNA提取试剂盒（BTN70901）基础上改良而的的大提升级产品，主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。跟柱式真菌DNA提取试剂盒相比，它具有下列特点：
1. 处理量大，一次可以处理1-3g 各种真菌组织。
2. 纯度高，OD260/280 一般在1.8以上。不含污染和抑制剂，得到的DNA 可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis 等各种后续分子生物学实验。
3. 采用玻璃珠法破碎细胞，属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援真菌DNA。
4. 产率一般在10-100μg/g 真菌样品。离心吸附柱最大吸附量为800μg。
5. DNA 片段长度一般在20-40kb 左右。
6. 适用范围广，适用于度大多数真菌材料，包括酵母（S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris）等。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	40ml
溶液B	40ml
溶液C	100ml
大提离心吸附柱	4套
通用洗柱液	200ml
DNA洗脱液2.0	5ml
酸洗玻璃珠，400μm	40g
说明书	1份

保存条件：
常温运输,4℃保存，有效期一年。
使用方法：
1. 对菌液：取60-100 mL 过夜培养的真菌菌液 (OD600 一般在1 以上)到干净的塑料离心管中，12000 rpm 离心2 分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落（约1 g），转移到装有20 mL 无菌水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000 rpm 离心2 分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料，一般取1-3 g 左右，直接加入到离心管中，在材料中加入无菌水20mL，振荡半分钟后12000rpm 离心2 分钟弃上清留沉淀。
4. 沉淀中加入10 mL 溶液A 和10 克的玻璃珠，涡旋震荡10 分钟，可以延长震荡时间。
5. 加入10 mL 的溶液B，涡旋震荡5 分钟，12000rpm 离心2 分钟，将上清液全部转移到一个50 mL 的干净的塑料离心管中。
6. 在上清中加入3 倍体积的溶液C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置2 分钟，然后12000rpm 离心1 分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。
7. 将20 mL 通用洗柱液加入离心柱，12000rpm 离心1 分钟，弃穿透液。
8. 重复上步操作一次。
9. 12000rpm 空甩1 分钟去除残留液体。
10. 将离心柱放置在一新的50 mL 塑料离心管中，加入500uL DNA 洗脱液2.0。
11. 室温放置5 分钟后12000rpm 离心1 分钟，管底即为真菌DNA 样品，吸取离心管中的DNA 溶液重新滴加在吸附柱上，离心洗脱以收集更多的DNA。
12. 所得DNA 可立即使用，也可长期保存在－20℃。
13. 注：如离心机转速不能达到12000rpm，可以用最大转速离心10-15min 代替12000rpm 离心1-2min。