BTN81202 真菌总蛋白质微量提取试剂盒

真菌总蛋白质微量提取试剂盒说明书
产品编号：BTN81202
规格：50T
产品及特点：
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于各种形态的各种酵母材料。本产品的其主要特点是：
1. 破壁效率高，能达到 80-90%。
2. 可以处理各种酵母样品。
3. 操作简单，得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二	1.5g
玻璃珠，400μm	5g
说明书	1份

保存条件：
常温运输、4℃保存（溶液B成分二需-20℃保存），有效期一年。
自备试剂：
酵母培养基。
使用方法：
准备工作：将溶液B 成分二（干粉）全部加到50mL 溶液B 成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液B，然后分装成小分（体积根据每次实验的样品数决定）并放-20℃长期保存。
1、将酵母细胞接种到5mL YPD 培养基中，30℃摇晃（250rpm/分钟）过夜培养使其OD600 达到0.5～2.0。
2、把酵母细胞培养物转到装有2mL 预冷溶液A 的10-15 mL 离心管中，混匀。
3、4℃ 5000g 离心5 分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4、用 30μL 溶液B 悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL 塑料离心管中。
5、100℃下保温3 分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6、加入 0.1g 的玻璃珠。
7、在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10 分钟。
8、加入 70 μl 溶液B，稍加振荡，置100℃保温1 分钟。
9、取 5-20μl 抽提液上样直接进行SDS-PAGE 凝胶电泳。