BTN81217 微量蛋白沉淀试剂盒

微量蛋白沉淀试剂盒说明书
产品编号：BTN81217
规格：50T
产品及特点：
本产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品，其原理是通过酸使蛋白质变性，溶解度降低，在离心条件下沉淀，而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。本系列产品名单如下：

产品名称	最低浓度	备注
TCA 蛋白沉淀浓缩试剂	5μg/mL	最常用酸沉淀法
TCA-DOC 蛋白沉淀浓缩试剂	1μg/mL	样品不得含SDS

它们具有下列特点：
1. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
2. 产品稳定，可室温长期放置。
3. 可以处理各种液体样品（如细胞或细菌培养物，细胞裂解物，蛋白质提取物等等）。
4. 浓缩效果强，可浓缩浓度低达1μg/mL的蛋白。
5. 可用于含SDS 的样品，但灵敏度稍低（5μg/mL）。
6. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂：
1M Tris-HCl，pH8.8（也许会用到）。
使用方法：
使用方法一（用于不含SDS 的样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL）
1、将100μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2、加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置15分钟。
4、加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5、冰上放置60分钟。
6、4℃12000-15000×g离心10分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、加入1 mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000-15000×g 离心15分钟。
9、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10 分钟左右。
11、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE 上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质TCA污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。
使用方法二（用于含SDS 的样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL）
1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品（浓度不低于5μg/mL）转移到一个自备的1.5 mL 塑料离心管中。
2、加入8 μL溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3、冰上放置30分钟或-20℃放置15 分钟（过夜放置更好）。
4、4℃ 12000-15000×g离心15 分钟。
5、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6、加入1 mL冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000-15000×g离心15分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9、样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE 上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质TCA 污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。