BTN81219 植物总蛋白质微量提取试剂(2DE)

植物总蛋白质微量提取试剂(2DE)说明书
产品编号：BTN81219
规格：30T/100T
产品及特点：
蛋白质样品的制备是2D电泳成功的关键，尤其是对植物材料，因为植物材料不但有坚硬的细胞壁，还含有大量的、可以干扰2D电泳的物质（如多糖、脂类、多酚、次生代谢物等）。本产品就是专门针对这一困难而开发，它有下列特点：
1. 可以处理各种植物材料（叶片、种子、果实等），包括新鲜或冻干的材料。
2. 操作简单，只有振荡和离心等简单步骤。
3. 能有效去除植物样品中常见的、干扰2D电泳的物质。
规格及成分：

成分	30T	100T
溶液A	30ml	100ml
溶液B	3ml	10ml
溶液C	60ml	200ml
溶液D	30ml	100ml
说明书	1份	1份

保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。溶液C 和溶液D 使用前需要放-20℃预冷。
自备试剂：
液氮。
使用方法：
1、称取 0.1-0.5g 植物组织（如果是叶片，一般用0.2g 即可；如果是含水分多的果实，一般用0.3-0.5g；如果是种子，一般用0.1g 即可），放入液氮中研磨成粉末。
2、加入 1 mL 溶液A，在冰上继续研磨至成糊状。注意：如果样品富含蛋白酶，还可以在溶液A 中加入相应的蛋白酶抑制剂（自备）。
3、将研磨液转移到一个干净的1.5mL 塑料离心管中，颠倒混匀后4℃ 15000g离心15分钟。
4、将上清液转移到一个新的1.5mL 塑料离心管中。
5、加入 100μL溶液B，颠倒混匀。
6、在冰上放置15分钟或在-20℃冰箱过夜。
7、4℃ 15000g 离心15分钟，小心移弃上清液。
8、向沉淀物加入1mL -20℃预冷的溶液C，震荡混合。
9、4℃ 15000g 离心10分钟，移弃上清液。
10、重复步骤8 和9一次。
11、加入1mL -20℃预冷的溶液D，震荡混合后4℃ 15000g 离心10分钟，去净上清液。
12、冷冻干燥1~2分钟，沉淀即可放冰箱保存或加入200μL 自备的等电聚焦上样液在室温下（温度不要超过30℃）溶解30分钟，再室温10000g 离心2分钟，将上清液转移到一个新的1.5mL 塑料离心管中。后续试验包括Bradford蛋白定量和2D 电泳。2D 电泳对蛋白上样量要求十分严格，因此强烈建议用户在进行2D 电泳前测定所得蛋白的浓度。