BTN81223 增强型DAB显色试剂盒

增强型DAB显色试剂盒说明书
产品编号：BTN81223
规格：100ml
产品及特点：
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶（HRP）的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量，进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：
 
本产品具有下列特点：
1. 即开即用，不需要用户准备任何材料。
2. DAB以干粉提供，方便运输。
3. 可用于各种印迹膜（包括Southern、Northern、Western印迹膜）和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4. 跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5. 显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。
规格及成分：

成分	规格
DAB干粉	100mg
10 mL棕色塑料瓶	1个
DAB溶解液	100ml
增强剂	1ml
H2O2	1ml
说明书	1份

注意：本产品可以配制100mL增强型DAB显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。
保存条件：
常温运输，4℃保存，有效期1年
自备试剂：
超纯水、HRP标记物（抗体或探针）处理过的印迹膜。
使用方法：
注意：DAB有毒性，处理时需要戴手套。
1. 从DAB溶解液中取5 mL到一个10 mL的棕色塑料瓶中（本试剂盒提供），将100 mg DAB干粉全部加入，充分振荡混匀，所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2. 按每cm²印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量，并按下表配制DAB显色液（此处以配制10 mL为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量）：

成分	用量
DAB溶解液	9.4ml
20×DAB浓缩液	0.5ml
增强剂	0.1ml
H2O2	10μl

注意：此溶液必须立即使用。
3. 如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中，室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时（一般需要2-3分钟，最长不超过10分钟，具体跟靶分子浓度密切相关），迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4. 如果是组织切片，则直接将DAB染色液滴加在切片上，室温避光放置10分钟，然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。