BTN90212 高载量PCR片段纯化试剂盒

高载量PCR片段纯化试剂盒说明书
产品编号：BTN90212
规格：50T/100T
产品及特点：
本试剂盒可用于PCR产物回收，并且对于一些酶反应液回收（酶切、连接、探针标记等）也同样适用。试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅胶膜。可回收50bp－40 kb的DNA片段，回收效率可达80%。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
1. 高效，回收效率高达90%。
2. 快速，整个过程只需要十余分钟，可同时处理多个样品，节省时间。
3. 纯度高，本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR等多种分子生物学实验。
4. 用途广，本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
5. 处理量大，每个离心吸附住最多可吸附的DNA量为20 μg。
6. 价格便宜，比国内绝大多数同种产品的价格便宜。
7. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。。
规格及成分：

成分	50T	100T
平衡液	25ml	50ml
通用溶胶液（专用上柱液）	15ml	30ml
离心吸附柱	50套	100套
通用洗柱液	50ml	100ml
DNA洗脱液	10ml	10ml
说明书	1份	1份

保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。
使用方法：
1. 离心吸附柱平衡：向离心吸附柱中加入500μL 的平衡液，12，000rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
2. 在含DNA 片段的PCR 反应产物中，加入3 倍体积的专用上柱液。
3. 60℃水浴5分钟。
4. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上液体收集管，静置3分钟，12,000rpm 离心半分钟并倒掉收集管中的液体。
5. 加入 700μL 通用洗柱液于离心柱中，室温静置2分钟，12,000 rpm 离心半分钟，倒弃收集管中的废液。
6. 12,000 rpm 离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。
7. 将离心柱置于一新的干净的离心管（自备）中，加入30-50μL 的通用洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央，静置3分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
8. 离心管底部所得溶液即为纯化的DNA 溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
注意事项：
1. 电泳回收DNA 时，电泳缓冲液可以为TAE、TBE 或者百奥莱博的DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2，回收效果为SuperBuffer-2 最好，TAE次之，TBE最差。
2. 专用上柱液含有容易挥发物质，请密闭保存。
3. 液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使DNA 与膜充分结合，提高回收效率。
4. 加专用上柱液的作用是洗盐。
5. 洗脱 DNA前的空甩很重要，以去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
6. 加 TE 洗脱DNA 时，最好把离心柱放入50-65℃水浴加热，但要注意把离心管密闭好；增大TE 使用量有利于回收，但要注意实际上样量与最终回收体积的关系，以便于计算回收率。TE 可以用水替代，但pH 不能低于7.5。
疑难解答：
Q：为何用硅胶膜吸附柱法回收TBE 胶中的DNA 效果不好？
A：因为TBE 中的硼酸会跟硅胶表面的OH 基团反应，而这些OH 又是吸附DNA所必需的。