BTN90402 蛋白胶微量回收试剂盒

蛋白胶微量回收试剂盒说明书
产品编号：BTN90402
规格：50T
产品及特点：
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品具有下列特点：
1. 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。
2. 适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶。
3. 回收率一般在50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。
4. 跟后续的实验兼容，包括2-D 电泳、质谱测序等。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	50ml
微型离心管专用研磨杵	50只

保存条件：
常温运输，4℃保存（微型离心管专用研磨杵可以室温保存），有效期一年。
使用方法：
1. 按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性蛋白电泳。
2. 切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。
注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。
3. 将切下的胶块转移到1.5 mL 塑料离心管中。
4. 用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5. 加入200μL溶液A，4℃摇晃洗脱至少2-16 小时（过夜）。此时最好将溶液B 放在冰箱预冷。
6. 10,000 g离心10分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。
7. 加入5 倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。
8. -20℃放置至少10-30分钟。
9. 室温12,000 g离心5-20 分钟，弃上清。
10. 室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验（2-D 电泳、质谱测序等）。