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公司新闻

BTN90901 菌体内毒素清除剂

发布时间:2017-10-01 10:12 |  点击次数:209

菌体内毒素清除剂说明书
产品编号:BTN90901
规格:200ml
产品及特点:
内毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli 细胞壁的主要成分,传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA 一起纯化出来,然后再用各种方法去除其中的内毒素,操作繁琐,DNA 回收率低。本产品可以直接把E.coli 表面的内毒素去除,从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA 提取,重组蛋白质提取)的污染。本产品具有下列特点:
1. 首个在菌体收集阶段去除内毒素的产品,从源头上避免了内毒素跟DNA 和胞浆蛋白的接触,从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速,用酶溶液温和清洗菌体3-4 次即可去掉细菌表面的内毒素,只需要10 分钟左右时间,不需要复杂仪器设备。
3. 高效,能去除99%以上的内毒素。
4. 跟各种质粒DNA 提取、基因组DNA 提取和蛋白质提取等操作兼容,DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA 丢失率可以高达50%)。
5. 不影响DNA 和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA 可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5 mL 离心管内),也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。
规格及成分:
成分 规格
菌体内毒素清除剂 200mL
说明书 1份
保存条件:
常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于菌液小于3 mL 的样品
1. 收集1.5-3 mL E.coli 饱和菌液,12,000 rpm 离心1 分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入1 mL 本产品温和混匀后10,000-12,000 rpm 离心1 分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4 次,得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA 提取或无内毒素蛋白质提取程序。
二:用于菌液多于3 mL 的样品
整个操作同上,只是在15 或50 mL 塑料离心管中进行,离心速度不能超过离心管的承受力,本产品的用量按比例增加。
疑难解答:
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA 和部分蛋白质相同,所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附,离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子),能够形成大小不等的聚合物,跟质粒DNA 和蛋白质大小接近,所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。

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