BTN91102 柱式骨骼DNA提取试剂盒

柱式骨骼DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN91102
规格：50T
产品及特点：
本产品是专门用于从动物骨骼（包括骨粉）样品中提取DNA的产品，20次规格足够50次微量提取。它具有下列特点：
1. 微量提取，一次可以处理300mg左右的骨骼（但需要先将骨粉变成骨粉）。
2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要40-60分钟。
3. 得到的DNA分子量不均匀，一般在20 Kb到100bp之间，具体取决于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	50mL
溶液B	15mL
溶液C	30mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液2.0	10mL
说明书	1份

保存条件：
常温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
1. 骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续PCR的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。
2. 用天平称取0.2克骨粉，转移到2mL塑料离心管中。
3. 加入1 mL溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。（注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。）
4. 65℃水浴放置30分钟。
5. 加入0.3mL的溶液B 和0.2mL的自备氯仿，充分振荡30秒混匀。
6. 12,000 rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
7. 加入0.5mL溶液C，颠倒混匀。
8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要 12,000 rpm室温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。
9. 加入0.5 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
10. 再加入0.5 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
11. 12,000 rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的液体会抑制后续的PCR。
12. 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30 uL DNA洗脱液，然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60-80℃再使用，效果更佳。
13. 12,000-15,000 g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
14. 取少量进行电泳检测。注意：一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围，其比例跟骨骼（或骨粉）的新鲜程度、加工过程（对骨粉）等因素密切相关。
15.DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。