BTN100406 溶菌酶干粉

溶菌酶干粉说明书
产品编号：BTN100406
规格：10g
产品及特点：
本产品是蛋清型溶菌酶，可以配制成溶菌酶A 溶液用于各种分子生物学实验。
规格及成分：

成分	规格
溶菌酶干粉	10g
说明书	1份

保存条件：
低温运输，4℃或-20℃保存，有效期两年。
使用方法：
注意：下面是用本产品裂解含pBR322 质粒的大肠杆菌的步骤，可用做裂解其他细菌的参考。本产品裂解大肠杆菌细胞的最适pH 是8.0±0.1。
1.过夜培养含pBR322 质粒的大肠杆菌，注意培养基中需要添加终浓度为25μg /毫升的四环素和终浓度为25μg /毫升的氨苄青霉素。
2.取1-2mL 培养液离心，去上清。
3.将沉淀重悬在350 微升的STET 缓冲液中。STET 缓冲液的配方是10 mM Tris-HCl pH8.0 ，0.1 M NaCl，1 mM EDTA，5% [w/v] TRITON X-100。
4.加入25 微升的新鲜配制的、浓度为10 mg/mL 的溶菌酶溶液（溶剂为10 mM Tris-HCl，pH8.0)。
5.漩涡式震动3 秒。
6.在37℃下细胞溶解30 分钟。
7.沸水浴中水浴40 秒灭活溶菌酶。
8.14000×g 离心裂解液。
9.用无菌牙签将沉淀(细胞碎片)去除。
10.含质粒DNA 的上清液可用于后续的质粒DNA 纯化和分析。