BTN100810 超快蛋白银染试剂盒

超快蛋白银染试剂盒说明书
产品编号：BTN100810
规格：1000ml
产品及特点：
核酸银染的原理是银离子(Ag+）可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，其灵敏度比考马斯亮蓝高100倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品，其特点如下：
1. 超快，整个过程只需要不到60分钟。
2. 操作简单，只有固定（30分钟）、染色（10分钟）和显影（10分钟）三步。
3. 灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍，能检测到10ng的蛋白质条带。
4. 三个成分中的两个都是现用现配，可重复性好。
规格及成分：

成分	规格
溶液A组分一（干粉）	2g
溶液A组分二，10×	100ml
溶液A组分三，10×	100ml
溶液B组分一，10×	100ml
溶液B组分二	5ml
说明书	1份

注：1000mL规格指可配制的溶液A（染色液）的体积，实际使用次数根据PAGE胶大小不同而不同。
保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：
去离子水，乙醇和乙酸。
使用方法：
一：配制银染固定液 100 mL （对mini PAGE胶）
将40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50 mL去离子水充分混合即可使用。
二：配制溶液A
需要配制的溶液A（染色液）的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液A。如果配制的溶液A的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液A需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	80ml
溶液A成分一	0.2g
溶液A成分二	10ml
溶液A组分三	10ml

二：配制溶液B
需要配制的溶液B（显色液）的体积完全跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。下面的用量是针对配制100mL溶液B。如果配制的溶液B的体积不是100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。溶液B需要新鲜配制。

成分	用量
去离子水	89.5ml
溶液B成分一	10ml
溶液B组分二	0.5ml

三：银染
1. PAGE电泳或SDS-PAGE电泳结束后，将胶转移到装有100 mL银染固定液的瓷盘中，摇晃30分钟以去除干扰银染的成分（如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等）。注：此步很重要，否则银染背景很高。
2. 用100 mL去离子水漂洗2次，每次2分钟。
3. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液A中，使溶液A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃处理10分钟。
4. 倒掉溶液A，用100 mL去离子水快速漂洗2次，每次半分钟。
5. 将PAGE胶转移到适当体积的溶液B中，使溶液B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现（一般需要10分钟左右）。
6. 迅速将PAGE胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深，如果有必要保存胶，可以用自备的5%的乙酸终止显色。