产品分类
公司新闻
BTN100917 蜗牛酶干粉
发布时间：2017-10-01 10:53 | 点击次数：852
蜗牛酶干粉说明书
产品编号：BTN100917
规格：5g
产品及特点：
本产品是从蜗牛（Helix pomatia）的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有β-glucoronidase、endo-β-glucanase、arylsulphatase、纤维素酶，果胶酶，淀粉酶，蛋白酶等20多种酶，呈褐色结晶粉末。可以用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球制备等。
规格及成分：
保存条件：
低温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂：样品等。
使用方法：
使用本产品处理酵母细胞举例：
1.配制山梨醇缓冲液（10mL）：1.82g山梨醇、0.042g柠檬酸钠，用10 mL pH5.8的磷酸钾缓冲液溶解，涡旋震荡混匀，超净台中，滤器过滤除菌。
2.取5 mL 山梨醇缓冲液加入到装有1g蜗牛酶的棕色瓶中，轻轻摇动混匀，务必使蜗牛酶完全溶解，使用之前用枪头挑一下瓶底，看是否有未溶解的酶，若有沉淀，则继续摇动或用枪头吹吸，使其溶解，得到的溶液为浓度是200mg/mL的蜗牛酶溶液。
3.取3-5 mL酵母细胞，200μL无菌水洗涤菌体（吹吸重悬），室温10000rpm离心1min，弃上清。重复洗涤2-3次。
4.将酵母细胞重悬于300-500μL巯基化合物中，32℃水浴15-30min。期间轻轻颠倒离心管两三次。
5.室温10000rpm离心1min，弃上清。将沉淀重悬浮于500 μL山梨醇缓冲液中。
6.按照每克细胞30-40mg蜗牛酶的比例，加适量体积的第2步配制的蜗牛酶溶液到酵母细胞溶液中，37℃保温1小时。（破壁率一般达90%以上。）
7.4℃保存或直接用于核酸、蛋白质提取制备。
附：巯基化合物配制方法
巯基化合物(0.04M EDTA和0.14M β-巯基乙醇)（30mL）：
产品编号：BTN100917
规格：5g
产品及特点：
本产品是从蜗牛（Helix pomatia）的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有β-glucoronidase、endo-β-glucanase、arylsulphatase、纤维素酶，果胶酶，淀粉酶，蛋白酶等20多种酶，呈褐色结晶粉末。可以用于真菌细胞核酸和蛋白质制备、原生质球制备等。
规格及成分：
| 成分 | 规格 |
| 蜗牛酶干粉 | 5g |
低温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂：样品等。
使用方法：
使用本产品处理酵母细胞举例：
1.配制山梨醇缓冲液（10mL）：1.82g山梨醇、0.042g柠檬酸钠，用10 mL pH5.8的磷酸钾缓冲液溶解，涡旋震荡混匀，超净台中，滤器过滤除菌。
2.取5 mL 山梨醇缓冲液加入到装有1g蜗牛酶的棕色瓶中，轻轻摇动混匀，务必使蜗牛酶完全溶解，使用之前用枪头挑一下瓶底，看是否有未溶解的酶，若有沉淀，则继续摇动或用枪头吹吸，使其溶解，得到的溶液为浓度是200mg/mL的蜗牛酶溶液。
3.取3-5 mL酵母细胞，200μL无菌水洗涤菌体（吹吸重悬），室温10000rpm离心1min，弃上清。重复洗涤2-3次。
4.将酵母细胞重悬于300-500μL巯基化合物中，32℃水浴15-30min。期间轻轻颠倒离心管两三次。
5.室温10000rpm离心1min，弃上清。将沉淀重悬浮于500 μL山梨醇缓冲液中。
6.按照每克细胞30-40mg蜗牛酶的比例，加适量体积的第2步配制的蜗牛酶溶液到酵母细胞溶液中，37℃保温1小时。（破壁率一般达90%以上。）
7.4℃保存或直接用于核酸、蛋白质提取制备。
附：巯基化合物配制方法
巯基化合物(0.04M EDTA和0.14M β-巯基乙醇)（30mL）：
| 0.5M EDTA | 2.4ml |
| 巯基乙醇（分析纯ρ=1.11439g/mL） | 294μl |
| 无菌水 | 27.3ml |