BTN100941 通用型全基因组扩增试剂盒

通用型全基因组扩增试剂盒说明书
产品编号：BTN100941
规格：30T
产品及特点：
本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点：
1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2. 可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3. 可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷，恒温（30℃）反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5. 产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异，微卫星差异，SNP，STR）等。
规格及成分：

成分	规格
WGA溶液A	75μl
WGA溶液B	30μl
dNTP（10mM）	20μl
BSA	10μl
超纯水	1ml
Phi 29 DNA聚合酶（10U/μL）	15μl
说明书	1份

保存条件：
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
自备试剂：
超纯水（无DNA 和DNase 污染）。
使用方法：
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
1. 在PCR塑料管中加入1 μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2. 在PCR管中依次加入2.5 μL WGA溶液A，1 μL WGA溶液B，超纯水4.3μL，轻柔吹打混合均匀（现在PCR管中总体积为8.8 μL）。
3. 95℃保温3-5分钟，室温短暂离心半分钟，然后冰上放置15分钟。
4. 然后依次向上述反应液中加入0.5 μL dNTP，0.2 μL BSA，0.5 μL Phi 29 DNA聚合酶（10 U/μL），轻柔吹打混合均匀。
5. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，最好在样品管中加入30-50 μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
7. 立即取3 μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意：WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料，所以需要先加上样缓冲液。
8. 扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。