BTN101101 线状DNA清除剂

线状DNA清除剂说明书
产品编号：BTN101101
规格：30次
产品及特点：
分离纯化环状DNA（质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA）的时候经常需要去除其中的基因组DNA污染，否则会对后续的PCR、WGA和测序等反应产生干扰。而基因组DNA一般都十分巨大，无论是线状（如真核细菌基因组DNA）还是环状(如细菌DNA)，经过常规的DNA纯化过程都会变成20-50 Kb大小的线状DNA，而上述环状DNA一般还能保持环状构型。根据这一特点，本公司开发了专门用于去除线状DNA的本产品，它有如下优点：
1. 即开即用，不需用户花费大量时间去摸索各种条件。
2. 酶法去除线性DNA，使线状DNA污染降级几个数量级，不会干扰后续试验。
3. 柱式法纯化回收环状DNA，能快速高效清除残留酶，得到的DNA可直接使用。
4. 酶法处理不依赖于DNA序列，适于于任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。
5. 适用的环状DNA包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA等。
6. 得到的环状DNA可用于多种后续试验，尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。
规格及成分：

成分	规格
线状DNA 清除剂溶液A	100μl
线状DNA 清除剂溶液B	30μl
微量核酸沉淀剂	2ml

保存条件：
低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
自备试剂：
75%乙醇。
使用方法：
1. 在干净塑料离心管中，按下表加入各成分（30 μL体系）：

成分	样品	正对照	负对照
DNA（1-10 μg）	（样品DNA）	（自备环状DNA）	（自备线状DNA）
溶液A	3μl	3μl	3μl
溶液B	1μl	1μl	1μl
	补水到30μL	补水到30μL	补水到30μL

2. 加200 μL石蜡油后，37℃保温16小时。注意：保温时间过短可能会形成短的DNA片段，影响后续反应，所以最好保温16小时。必须加石蜡油，否则长时间保温期间水分会蒸发到管盖上。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。
3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。
4. 如果使用了石蜡油，则需要将30 μL酶反应溶液转移到一个新的1.5 mL离心管中，再加入60μL 微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油，则直接在30μL酶反应溶液中加入60 μL 微量核酸沉淀剂。注意：微量核酸沉淀剂取用前需要充分摇匀。
5. 室温15000 g离心10分钟。
6. 弃上清后加自备的75%乙醇1 mL，振荡混匀。
7. 15000 离心3-5分钟，弃上清。
8. 再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的DNA沉淀，可溶于TE或水中。