BTN111007 MALDI蛋白样品处理试剂盒

MALDI蛋白样品处理试剂盒说明书
产品编号：BTN111007
规格：500T
产品及特点：
本产品用于基质辅助激光解吸离子化（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization，MALDI）分析，所含的基质液是MALDI分析的必不可少的关键成分，其主要作用一是起到分子溶剂的作用，使样品分子分开，但又不会使蛋白质发生共价修饰；而是能从激光脉冲中吸收能量，使蛋白质发生瞬间相变，用于质谱分析。本产品的特点是：
1.即开即用，用户不需要单独准备各种成分。
2.经过优化，可用于各种样品的MALDI分析。
可以选择CCA（羟基苯丙烯酸）、DHB（2,5-二羟基苯甲酸）和SA（芥子酸）三种不同的基质。CCA适用于分子量在5Kd一下的蛋白质和多肽分析（肽指纹图谱）；DHB适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析；SA适合分子量在3Kd-150Kd的蛋白质分析。
规格及成分：

成分	规格
MS专用溶解液	50ml
基质液成份一	50mg
基质液成份二	10ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。
使用方法：
一：样品准备
1、将蛋白样品真空冻干后加入MS专用溶解液100μL，溶解半小时（期间可以按下步配制基质液）。蛋白质的终浓度最好在1-10 pmol/μL之间。如果是Reverse-Phase-HPLC制备的样品，则可以不加MS专用溶解液而直接使用。注意：一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、盐、去污剂和变性剂等去除，否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成，没有蛋白晶体的形成就不能进行MALDI分析。
2、称量1 mg 左右的基质干粉到一干净的EP管中，按每mg CCA加100μL基质液成份二的比例加入基质液成份二，混匀后离心。注意：此是用于结晶用的饱和溶液，可能有沉淀，故需要离心。注意：基质液最好新鲜配制。本试剂盒提供50mg，足够配50次 200μL的基质液。
3、选用下面两种上样法之一上样。也可以自选其他的上样方法。
二：Dried-Droplet法上样
1、将1μL蛋白质样品与1μL新配的饱和基质液混匀。注意：可以多做几个不同的蛋白质样品和基质液的比例，在1:1-10:1均可。
2、用移液器将1μL混合液点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净。注意：不要有气泡，枪头也不要触及靶面，也不能搅动上样后的混合液，在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净，以免上次试验的残留样品的干扰。
3、如果样品中含有非挥发性杂质，在此步可以用自备的MilliQ水洗涤晶体一次。
4、将样品靶插入质谱仪内，后续操作按MALDI-TOF仪器使用手册进行。
5、同样方法处理自备对照样品（一般仪器厂家提供）。
三：Thin-Layer法上样
1、用移液器将1μL基质液点到MS仪器的样品靶上，在基质液挥发前迅速进入下一步操作。
2、迅速用移液器将1μL样品点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净，一般需要5分钟。
3、将样品靶插入质谱仪内，后续操作按仪器使用手册进行。
4、同样方法处理自备对照样品（一般仪器厂家提供）。
5、同样方法处理标准品（仪器厂商提供）。