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BTN111109 DOP-PCR试剂盒
发布时间：2017-10-01 11:35 | 点击次数：287
DOP-PCR试剂盒说明书
产品编号：BTN111109
规格：50T
产品及特点：
DOP-PCR（Degenerate Oligonucleotide Primer PCR，简并寡聚核苷酸引物PCR）是扩增全基因组的方法之一，它利用中间含有6 个随机碱基的22nt 引物，通过两轮PCR（第一轮低温复性，第二轮高温复性）而将模板DNA 扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA 聚合酶的MDA，但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势，在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发，它具有下列特点：
1. 专门用于高度降解的DNA，方便，含有除模板DNA 和引物以外的所有成份，简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度，使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶，降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间，平均500bp 左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR 产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
规格及成分：
保存条件：
低温运输、-20℃保存, 保存期限为12 个月。不要反复冻融。
自备试剂：
DNA 模板、引物、超纯水。
使用方法：
1. 在一干净的PCR 管中，加入下列成分：
3. 结束后取5-10 μL直接上样电泳（不需要额外再加DNA 上样液）, 红色染料电泳速度相当于50 bp DNA片段。DOP-PCR产物的长度一般在300-1700bp之间。
4. 所得DOP-PCR 产物可以用于后续PCR检测或其他分析。
产品编号：BTN111109
规格：50T
产品及特点：
DOP-PCR（Degenerate Oligonucleotide Primer PCR，简并寡聚核苷酸引物PCR）是扩增全基因组的方法之一，它利用中间含有6 个随机碱基的22nt 引物，通过两轮PCR（第一轮低温复性，第二轮高温复性）而将模板DNA 扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA 聚合酶的MDA，但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势，在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发，它具有下列特点：
1. 专门用于高度降解的DNA，方便，含有除模板DNA 和引物以外的所有成份，简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度，使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶，降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间，平均500bp 左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR 产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
规格及成分：
| 成分 | 规格 |
| DOP-PCR Magic Mix | 750μl |
| DOP-PCR 引物(20 pmol/μL) | 250μL |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
低温运输、-20℃保存, 保存期限为12 个月。不要反复冻融。
自备试剂：
DNA 模板、引物、超纯水。
使用方法：
1. 在一干净的PCR 管中，加入下列成分：
| 成分 | 阴性对照 | 样品 |
| DOP-PCR MagicMix | 25μL | 25μL |
| 基因组DNA 模板(自备)或单个细胞 | 不加 | 10-100 pg（或一个单个细胞） |
| DOP-PCR 引物(20 pmol/μL) | 5μl | 5μl |
| 补水到 | 50μl | 50μl |
- 放入PCR仪中按下列参数进行DOP-PCR。
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| 第一轮PCR(12 个循环) | 94℃ | 1min |
| 30℃ | 1.5min | |
| 72℃（30℃升到72℃的时间设定为3 分钟） | 3min | |
| 第二轮PCR(35 个循环) | 94℃ | 1min |
| 62℃ | 1min | |
| 72℃（每次循环后此步的保温时间延长14 秒） | 2min | |
| 延伸 | 72℃ | 7min |
| 4℃ | Forever |
4. 所得DOP-PCR 产物可以用于后续PCR检测或其他分析。