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BTN120202 血液保存和DNA纯化套装
发布时间：2017-10-01 11:36 | 点击次数：232
血液保存和DNA纯化套装说明书
产品编号：BTN120202
规格：100T
产品及特点：
本产品包括百奥莱博独家推出的在室温条件下长期保存用于DNA 提取的血液样品的保存液和血液DNAout, 它通过裂解细胞并高效抑制DNase 的活性而达到长期保证DNA 分子的完整性，并是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA 的试剂。具有下列特点：
1. 适用于各种动物血液（包括禽类血液）。
2. 保存时间长，可常温保存血液DNA 长达六个月，尤其适合于野外血液样品采集。
3. DNA 完整性好，纯化后长度在20-50 Kb之间。
4. DNA 纯净，OD260/OD280 在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA 产量一般在30-50μg/mL全血。
5. 用量广泛，每次可处理少达20μL(对禽类动物血液)，多达1mL的血液（对哺乳动物血液）
6. 操作简单，整个过程约20分钟，室温操作，适合大规模样品处理。
7. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格只有其一半左右。
8. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分：
成分 规格
非冻型血液保存液 100ml
溶液A 50ml
溶液B 50ml
离心吸附柱 100套
通用洗柱液 100ml
DNA洗脱液 10ml
说明书 1份
保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
A：血液保存
一: 哺乳动物血液（包括人血液）
1. 将抗凝血（1-10mL）加入到适当容量的塑料离心管中。
2. 加入等体积的非冻型血液保存液，充分振荡混合均匀。
3. 常温闭光保存直到使用。
二: 禽类血液
1. 由于禽类血液有核细胞量远高于哺乳动物，血液的使用量很少，一般只有哺乳动物血液用量的1/100 到1/1000，所以需先用等体积的水将非冻型血液保存液稀释，然后直接将禽类血液加入。其余操作同上。
B: DNA 提取
1. 在500 μL 血液+血液保存液的混合液中，加入500μL溶液A和200μL氯仿（自备），振荡1分钟。
2. 4℃12000 g 离心10分钟，小心将上清转移至一新的1.5 mL 塑料离心管中。注意：如果室温离心，则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚，只能得到很少的上清。
3. 加入2 倍上清体积的溶液B，立即轻柔颠倒混匀。
4. 将液体转移到离心吸附柱中并静止2-5分钟，以使DNA 与膜充分结合。
5. 室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
6. 加0.7 mL 通用洗柱液，室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
7. 加0.3 mL 通用洗柱液，室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
8. 室温12，000 g 离心30秒，去尽残留液体（此步十分重要，不要省略）。
9. 将离心吸附柱置于一新的1.5 mL 塑料离心管中，加入50 μLDNA 洗脱液，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液在65℃预热后再使用，洗脱DNA 的效果更佳。
10. 室温12000g 离心30秒，离心管底溶液即DNA 溶液，可立即使用或-20℃长期保存。
疑难解答：
Q：保存血液样品时温度越低越好吗？
A：不是。Tegelstrom 曾比较了分别在-70℃, -20℃, 4℃保存了6个月的蛙血，发现保存温度越低，血液DNA 的断裂越严重（详见 Tegelstrom,1989. Cold room Storage of blood may be better than storage at -70℃. Fingerprint News, 4:5-6）。
Q:本产品是否可以用于放量操作?
A: 可以在大的离心管中进行放量操作，如每次处理5-100mL血液，只是客户需要单独购买红细胞裂解液，并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
Q:冷冻血液为何DNA产量很低?
A: 冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和细胞核膜，红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失，所以最后得到的DNA是没有被冰晶刺破的细胞的DNA。
产品编号：BTN120202
规格：100T
产品及特点：
本产品包括百奥莱博独家推出的在室温条件下长期保存用于DNA 提取的血液样品的保存液和血液DNAout, 它通过裂解细胞并高效抑制DNase 的活性而达到长期保证DNA 分子的完整性，并是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA 的试剂。具有下列特点：
1. 适用于各种动物血液（包括禽类血液）。
2. 保存时间长，可常温保存血液DNA 长达六个月，尤其适合于野外血液样品采集。
3. DNA 完整性好，纯化后长度在20-50 Kb之间。
4. DNA 纯净，OD260/OD280 在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA 产量一般在30-50μg/mL全血。
5. 用量广泛，每次可处理少达20μL(对禽类动物血液)，多达1mL的血液（对哺乳动物血液）
6. 操作简单，整个过程约20分钟，室温操作，适合大规模样品处理。
7. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格只有其一半左右。
8. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分：
成分 规格
非冻型血液保存液 100ml
溶液A 50ml
溶液B 50ml
离心吸附柱 100套
通用洗柱液 100ml
DNA洗脱液 10ml
说明书 1份
保存条件：
常温运输及保存，有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
A：血液保存
一: 哺乳动物血液（包括人血液）
1. 将抗凝血（1-10mL）加入到适当容量的塑料离心管中。
2. 加入等体积的非冻型血液保存液，充分振荡混合均匀。
3. 常温闭光保存直到使用。
二: 禽类血液
1. 由于禽类血液有核细胞量远高于哺乳动物，血液的使用量很少，一般只有哺乳动物血液用量的1/100 到1/1000，所以需先用等体积的水将非冻型血液保存液稀释，然后直接将禽类血液加入。其余操作同上。
B: DNA 提取
1. 在500 μL 血液+血液保存液的混合液中，加入500μL溶液A和200μL氯仿（自备），振荡1分钟。
2. 4℃12000 g 离心10分钟，小心将上清转移至一新的1.5 mL 塑料离心管中。注意：如果室温离心，则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚，只能得到很少的上清。
3. 加入2 倍上清体积的溶液B，立即轻柔颠倒混匀。
4. 将液体转移到离心吸附柱中并静止2-5分钟，以使DNA 与膜充分结合。
5. 室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
6. 加0.7 mL 通用洗柱液，室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
7. 加0.3 mL 通用洗柱液，室温12000 g 离心30秒，弃收集管中的废液。
8. 室温12，000 g 离心30秒，去尽残留液体（此步十分重要，不要省略）。
9. 将离心吸附柱置于一新的1.5 mL 塑料离心管中，加入50 μLDNA 洗脱液，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液在65℃预热后再使用，洗脱DNA 的效果更佳。
10. 室温12000g 离心30秒，离心管底溶液即DNA 溶液，可立即使用或-20℃长期保存。
疑难解答：
Q：保存血液样品时温度越低越好吗？
A：不是。Tegelstrom 曾比较了分别在-70℃, -20℃, 4℃保存了6个月的蛙血，发现保存温度越低，血液DNA 的断裂越严重（详见 Tegelstrom,1989. Cold room Storage of blood may be better than storage at -70℃. Fingerprint News, 4:5-6）。
Q:本产品是否可以用于放量操作?
A: 可以在大的离心管中进行放量操作，如每次处理5-100mL血液，只是客户需要单独购买红细胞裂解液，并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
Q:冷冻血液为何DNA产量很低?
A: 冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和细胞核膜，红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失，所以最后得到的DNA是没有被冰晶刺破的细胞的DNA。