BTN120409 BAL 31核酸酶

BAL 31核酸酶说明书
产品编号：BTN120409
规格：50U
产品及特点：
BAL 31 Nuclease（BAL 31 核酸酶）纯化自埃氏交替单胞菌（Alteromonasespejiana）BAL-31 培养物。BAL-31 核酸外切酶降解双链 DNA 的 3´ 和 5´ 末端，不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链 DNA 单链区和双链 RNA 的单链区进行切割。本产品具有下列特点：
1. 从两端逐步对双链 DNA 进行切割，缺失的长度适合于100-1,000个碱基左右。
2. 加入EGTA 可失活。
3. 限制性酶切图谱的构建。
酶贮存溶液：
10 mM Tris–HCl（pH8.0），50 mM NaCl，1.5 mM CaCl2，1.5 mM MgCl2，0.25 mM EDTA，200 ug/mL BSA，50% Glycerol。
活性定义：
1 单位指在 50 μl 反应体系，1X 核酸酶 BAL-31 反应缓冲液，30℃ 条件下，10分钟从线性双链 φX174 DNA（40 μg/ml）的两端各切下 200 个碱基对所需要的酶量。
1× 反应Buffer：
600 mM NaCl，20 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），1 mM EDTA，12 mM MgCl2，12 mM CaCl2
热失活：
65℃ 加热10分钟。
规格及成分：

成分	规格
BAL 31 核酸酶(1 U/μL)	50U
2×反应Buffer	1ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
 
 
 
 
 
使用方法：
使用举例

• 在离心管中加入下列溶液:

成分	用量
pBR322 -Ava I fragment	3μg ( 2.0 pmol ）
2×反应 Buffer	37.5μl
BAL 31 Nuclease	3-6U
H2O	up to 75 μl

1. 30℃保温。分别于 1、2、3 min 时各取样 25 μl。
2. 加入20 mM EGTA，65℃ 加热 10 分钟灭活酶。
3. 用1% Agarose 电泳确认 DNA 片段。
注意事项：
1. 该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端，但该混合物仍可以直接进行克隆。
2. 如果需要，可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3. 只有在20 mM EGTA 存在条件下，酶的热失活才有效。