BTN120410 核酸外切酶I

核酸外切酶I说明书
产品编号：BTN120410
规格：750U
产品及特点：
E.coli核酸外切酶I（Exonuclease I）是一个分子量为54.5kDa的酶，具有单链特异性3’→5’核酸外切酶活性，可以从单链DNA的3’-OH末端逐个分子切下5’-单核苷酸。本酶对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。可通过80℃ 20分钟的热处理使之失活。此产品特点是：
1. 纯化PCR产物用于测序或megaprimer PCR。对PCR产物进行测序时，残存引物和dNTP会干扰测序反应，使用本产品可降解多余的引物，与SAP（BTN120403）同时使用还可降解多余的dNTP，所得PCR 产物可不经过精制直接进行测序反应。
2. 在反应液中去除带3’-OH末端的单链DNA片段。
3. 不能酶切被磷酸化或乙酰化保护的3’-OH末端。
规格及成分：

成分	规格
核酸外切酶I（5 U/μL）	150μl
10×核酸外切酶I Buffer	1ml

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期半年。
使用方法：
一、单链DNA 的特异性降解
1. 在微量离心管中配制下列反应液。

含ssDNA 的样品	2.5μg
10×核酸外切酶I Buffer	2μl
核酸外切酶I（5 U/μL）	10～50 U
dH2O	up to 20 μL

2. 在37℃下反应30 分钟。
3. 80℃ 20 分钟终止反应。
二、PCR 产物的纯化
1. 在微量离心管中配制下列反应液（此酶在天恩泽的PCR Mix 中有活性，
故不需要加10×核酸外切酶I Buffer）:

PCR Mix（PCR 后的反应液）	5μl
核酸外切酶I（5 U/μL）	2μl
SAP 或CIP	1μl

2. 混合后在37℃下反应15 分钟。
3. 80℃ 20 分钟终止反应。
4. 所得PCR 产物可以直接用于测序，但最好不要用于克隆。