BTN120708 凝血酶
发布时间:2017-10-01 11:43 | 点击次数:
凝血酶说明书
产品编号:BTN120708
规格:1000U
产品及特点:
凝血酶(Thrombin,Factor IIa)是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶,选择性识别并切割纤维蛋白原(fibrinogen)的Arg-Gly 键,水解释放纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B(FPB),由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。凝血酶在体内主要以肝脏合成的酶原-凝血酶原(prothrombin,II 因子)的形式存在,经活化的X 因子(Factor Xa)切割后释放出活性肽,并将凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一条轻链(A chain, MW ~6 kDA)和一条重链(B chain, MW ~31 kDa)
通过二硫键连接而成。某些情况下,α-凝血酶会发生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶,这两种凝血酶可以切割合成的显色底物,但是纤维蛋白原凝血活性比较弱。
凝血酶还含有γ-羧基谷氨酰残基,通过与携带负电荷的磷脂表面发生Ca2+依赖性的相互作用,进而促进凝血酶原转化为凝血酶。
凝血酶是凝血机制中的关键酶,直接参与止血,促进凝血和抗凝血等生理过程中的最后一步,广泛应用于诊断学领域,包括凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化用于血清质控等;另外,凝血酶常作为一种工具蛋白酶,用来位点特异性切割融合蛋白(含凝血酶识别位点),本产品酶活为40-300 NIH U/mg 蛋白。
凝血酶酶最适切割位点:
1. A-B-Pro-Arg-‖-X-Y (A 和B 为疏水氨基酸,X 和Y 为非酸性氨基酸)。
2. Gly-Arg-‖-Gly。
本产品为来源于牛血浆凝血酶本产品仅用于科研,禁止用于临床或者人体。
规格及成分:
成分 | 规格 |
凝血酶 | 1000U |
说明书 | 1份 |
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 溶于水,配制成10 mg /mL;也可溶于0.1%BSA 溶液中配成100 U/mL储存液,根据使用量分配于不同的小管中,冻存于-20℃保存。
2. 凝血酶对不同的融合蛋白切割效率不一样,首先要进行小量切割试验。比如固定融合蛋白10 ug,加不同量的凝血酶(如0.1 U、0.2 U、0.5 U、1 U等),在不同的温度(如4℃、16℃、室温或37℃等)下进行试验。摸好最佳条件后再进行扩大酶切实验,取一定体积凝血酶溶液参加反应即可。
3. 将未用完的凝血酶溶液分装,迅速放置-20℃以下温度保存,否则很快失去活性。