人淋巴细胞分离液1.077(FICOLL配置)说明书
产品编号：BTN120905
规格：200ml
产品及特点：
外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和白细胞等细胞密度较大，为1.090 g/mL 左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090 g/mL，血小板为1.030～1.035 g/mL。本公司将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合，调整比重、pH 值和渗透压，经过澄清及除菌过滤后制成一种密度在1.077 g/mL 并且近于等渗的溶液（分层液），经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。
本产品适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞（主要为淋巴细胞），无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。本产品收集淋巴细胞的纯度大于80%。
规格及成分：

成分	规格
人淋巴细胞分离液1.077(FICOLL配置)	200mL
说明书	1份

保存条件：
常温运输和保存（如4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果），有效期两年。
自备试剂：
PBS溶液。
使用方法：
本产品易感染细菌，需无菌条件下操作。全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先根据样本量大小，分以下几种情况：
一、使用15 mL离心管时：
情况A：血液样本量小于3 mL时，实验方法如下：
1. 取一支15 mL离心管，加入3 mL分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，400-650 g，离心20-30分钟（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
3. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15 mL离心管中，向所得离心管中加入10 mL PBS溶液，混匀细胞。
5. 250 g，离心10分钟。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5 mL PBS溶液重悬所得细胞。
8. 250 g，离心10分钟。
9. 重复6、7、8，弃上清后以0.5 mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况B：血液样本量为3-6 mL时，实验方法如下：
1. 取一支15 mL离心管，先加入与血液样本等量的分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，450-650 g，离心20-30分钟（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过1200g）。
3. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15 mL离心管中，向所得离心管中加入10 mL PBS溶液，混匀细胞。
5. 250 g，离心10分钟。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5 mL PBS溶液重悬所得细胞。
8. 250 g，离心10分钟。
9. 重复 6、7、8，弃上清后以0.5 mL 后续实验所需相应液体重悬细胞。
二、使用50 mL离心管时：
情况A：血液样本量为6-10 mL时，实验方法如下：
1. 取一支50 mL离心管，先加入与血液样本等量的分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，500-950 g，离心20-30分钟（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过1200g）。
3. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15 mL离心管中，向所得离心管中加入10 mL PBS溶液，混匀细胞。
5. 250 g，离心10分钟。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5 mL PBS溶液重悬所得细胞。
8. 250 g，离心10分钟。
9. 重复6、7、8，弃上清后以0.5 mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况B：血液样本量为10-20 mL时，实验方法如下：
1. 取一支50 mL离心管，先加入与血液样本等量的分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，500-1100 g，离心20-30分钟（注：
根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过1200g）。
3. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色
淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15 mL离心管中，向所得离心
管中加入10 mL PBS溶液，混匀细胞。
5. 250 g，离心10分钟。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5 mL PBS溶液重悬所得细胞。
8. 250 g，离心10分钟。
9. 重复6、7、8，弃上清后以0.5 mL后续实验所需相应液体重悬细胞。