柱式鼠尾DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN121102
规格：50T
产品及特点：
大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料，鼠尾则是小鼠最佳活体样品，常用于基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系，可以快速得高质量、高纯度的基因组DNA。本产品具有下列特点：
1. 即开即用，不需要自己准备各种溶液。
2. 简单快速，最快可在60 分钟内从0.5 鼠尾中提取到10μg DNA。
3. 柱式法回收，所得DNA 纯度高（OD260/280一般在1.7-1.9）。片段大（一般在20 kb以上）、纯度高。
4. 安全环保：无需有机试剂抽提。
5. 可用于后续的酶切、PCR、Southern 杂交、文库构建等实验。
6. 除鼠尾外，还可用于其他动物组织（心，肝、肾、脾和肌肉等）。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液（10mg/mL）	1ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱（15层膜）	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输及保存（蛋白酶K 溶液需要低温运输，-20℃保存），有效期一年。
自备试剂：
氯仿。
使用方法：
1. 剪取0.5-1cm鼠尾（约15-30mg），尽量剪短成的1mm 左右小段，放入干净的1.5 mL 塑料离心管中。若不需要立即使用，可以在液氮中或-80℃长期放置，或-80℃放置数天。如果是动物心，肝、肾、脾和肌肉等组织，则取30mg左右并充分剪碎。
2. 加入1 mL 溶液A 和20 μL 蛋白酶K 溶液（10 mg/mL），37℃保温10小时（一般过夜保温就可以）。也可以放置于65℃金属浴或水浴中保温2小时，其间每间隔10 分钟涡旋混匀一次（或用手指用力弹击离心管底部数次）以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾，可以适当增加酶解时间到3-4小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态，则效果更佳。
3. 加入0.3 mL的溶液B 和0.2 mL的自备氯仿，振荡器上振荡30 秒充分混匀。
4. 12,000 rpm 室温离心3 分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5. 在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12,000rpm 室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7. 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 离心半分钟（此步为第二次洗涤，一般可以省略）。
9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10. 将离心吸附柱放置在一新的1.5 mL 塑料离心管中，加入30-50 μL DNA 洗脱液2.0。
11. 12,000 rpm 离心1 分钟，管底即为DNA 溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。