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公司新闻

BTN121122 柱式探针纯化试剂盒

发布时间:2017-10-01 17:11 |  点击次数:

柱式探针纯化试剂盒说明书
产品编号:BTN121122
规格:10T
产品及特点:
本产品是基于分子排阻层析原理的、专门用于纯化同位素和非同位素标记的核酸探针的试剂盒。在分子排阻层析过程中,大分子(标记的核酸探针或Oligo 探针)将绕过层析介质,快速穿透出层析柱,小分子(未参入的核苷酸)将进入层析介质中,缓慢穿透出层析柱。根据这一时间差而将两者分开。
本产品具有下列特点:
1. 即开即用,提供纯化所需要的所有溶液和介质,不需要单独准备每种试剂,免去用户自己摸索条件。
2. 适用于PCR 标记、随机引物标记、切口平移和填入法标记。
3. 能去掉绝大部分的未标记物、盐离子等小分子。
4. 足够10 次纯化使用,每次可以纯化50 μL 的标记反应液。
5. 可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5 等非同位素标记的DNA 和RNA 探针(由于标记分子带非极性基团,容易进入有机相,因此这些探针不能用传统的酚氯仿抽提-乙醇沉淀法纯化)。
规格及成分:

成分 规格
Sephadex G50 介质 15ml
0.7 mL 离心柱及管套 10套
TE溶液 10ml
说明书 1份
保存条件:
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂:
自备标记探针。
使用方法
注意:由于非同位素标记的探针浓度一般都比较低,非常容易吸附到枪头或离心管的表面,造成探针的损失,因此最好使用硅化的离心管和枪头。
1. 摇晃Sephadex G50介质至均匀,迅速转移0.5mL 到离心柱中,套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm 室温离心1分钟,Sephadex G50介质将压紧在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,再加0.5mL 的摇晃后得到的Sephadex G50 介质,2000rpm室温离心1分钟。
4. 经上述步骤会得到体积约为0.5mL 压紧后的Sephadex G50介质。如不足,再加入少量的G50介质离心,直到体积达到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5. 在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50 μL TE 缓冲液,套上套管,2000rpm 室温离心1 分钟,测量收集管中穿透液的体积。
6. 重复上步3-5 次,直到收集管中穿透液的体积跟加入的体积一样(50μL)。
7. 将50 μL 的标记探针(必须使用50 μL 样品。如果没有50 μL,需要用TE 缓冲液或水补足到50 μL)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面,套上一个自备的(最好是硅化的)离心管。
8. 2000rpm 室温离心1 分钟,离心管中的穿透液将含标记探针,未参入的标记物将滞留在介质中。
9. 电泳或点杂交检测探针回收效率后直接使用或放-20℃长期保存。