磁珠血液DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN130509
规格：96T
产品及特点：
本产品是利用磁珠法提取血液基因组DNA 的试剂盒，所含生物磁珠是一种新型的功能化固体载体，其表面包被有活性基团，可以与多种生物活性物质发生偶联，同时具有液体的流动性和固体磁性材料等特点，在外磁场的作用下可以定向移动和集中，当撤去外磁场后，稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中，从而使固液相的分离变的十分快捷方便，通过简单的洗脱可以得到纯度很高的目的物质。其操作流程如下：
 
本试剂盒所含磁珠微粒可以特异地吸附DNA，通过洗涤，去除DNA 以外的RNA、蛋白质等杂质，从而达到分离纯化DNA 的目的。它具有下列特点：
1. 操作快速简捷，一般可在60 分钟内完成。适用于新鲜血液、冻存血液和干血点等样品。
2. 所得 DNA 纯度高， OD260/OD280 一般达1.7-1.9。
3. DNA 得率高。得到的DNA 长度可达20kb-50kb，可用于PCR、文库构建、Southern-blot 和各种酶切反应等。
4. 性价比高，质量与进口试剂盒相当，但价格更便宜。
5. 本产品既适用于手工提取又能用于工作站提取。
规格及成分：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	2×13 mL
溶液C	2×15 mL
溶液D	15ml
蛋白酶K溶液	2×1 mL
磁珠悬浮液	2×1 mL

保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。蛋白酶K溶液 需4℃保存。
自备试剂：
样品、无水乙醇等。
使用方法：
使用前请先在溶液B和溶液C中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
1. 在 96 深孔板中加入20μL 蛋白酶K溶液。
注：当样本数目比较大时，可以按每200μL溶液A中加入20μL 蛋白酶K溶液的比例预先混合，混合后每个样本用量为220μL。
2. 加入样本:
1). 血液样本：转移100μL 全血（若为冻存的样品请待其完全解冻后再处理）至上步的深孔板中。
2). 干血点：三片3×3 mm2 的样品。
3. 每孔加入200μL 溶液A，抽打混匀或振荡混匀。
注：若溶液A 中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
4. 消化材料：
1). 血液样本：将离心管置于56℃，孵育10min。
2). 干血点：将离心管置于56℃，孵育10min。
消化完全后，为了确保磁珠彻底重悬，请在使用前振荡混匀。
5. 每孔加入200μL 无水乙醇，抽打混匀或振荡混匀，室温放置5min。
6. 每孔加入15μL 磁珠悬浮液，抽打混匀或振荡混匀。如果是干血点样本，加入磁珠悬浮液10μL。
7. 将深孔板放置于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
8. 将深孔板从磁力架上取下，加入500μL 溶液B（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），抽打混匀或振荡混匀。
9. 将深孔板放置于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
10. 将深孔板从磁力架上取下，加入600μL 溶液C（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），抽打混匀或振荡混匀。
11. 将深孔板放置于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时小心去除液体。
12. 重复操作步骤10、11，液体尽量去除干净。
13. 深孔板于磁力架上，室温晾干10-15min。
注：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
14. 将深孔板从磁力架上取下，加入50-100μL 溶液D，抽打混匀或振荡混匀，置于56℃，孵育10min。
15. 将深孔板放置于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时小心将DNA 溶液转移至收集板，并于适当条件保存。