环氧基磁珠说明书
产品编号：BTN130517
规格：2ml
产品及特点：
本产品表面进行了环氧基活化，可以用来和蛋白质以及其他配体表面的羟基、氨基或硫醇基团共价键结合，实现偶联在磁珠上的目的。该磁珠具有长亲水性间隔臂使它特别适用于小分子的固定化。其具有下列特点：
1. 活性基团：环氧基。
2. 磁珠基质：二氧化硅磁珠。
3. 平均粒径为1μm，浓度为20 mg/mL。
4. pH 稳定范围：1-9。
5. 保存于DMSO 中，室温保存。
6. 核酸提取能力>400 ng/mg（4000 bp 质粒检测结果）。
规格及成分：

成分	规格
环氧基磁珠	5ml
说明书	1份

保存条件：
常温运输和保存，气温过低会有“结冰”现象，有效期一年。
自备试剂：
磷酸盐缓冲液、BSA、甘氨酸、吐温-20 等。
使用方法：
1. 配制各种所需缓冲液：
1) 偶联液：0.1 M 磷酸盐缓冲液，pH=8.5。
2) 封闭液：用偶联液配制的20 mg/mL 的BSA 和20 mg/mL 的甘氨酸溶液。
3) 淋洗液：0.1%吐温-20 的PBS 溶液，pH=7.4。
4) 保存液：用淋洗液配制的10 mg/mL 的BSA、0.02%叠氮钠的溶液。
2. 磁珠的预处理
磁珠保存在DMSO 溶液里，请在偶联配体前，取出所需量的磁珠，用0.5 mL 偶联液将其淋洗三遍。
3. 偶联反应注意事项
磁珠反应的整个过程中要保证磁珠悬浮状态，不要出现沉淀或者挂壁的现象，推荐选择大小合适的棕色玻璃瓶，横置于恒温摇床中，以达到良好的偶联效果。
4. 偶联配体（以抗体为例）
1) 抗体的预处理: 如果抗体里含有其他氨基、羟基的杂质分子，需通过透析、G-25 等手段将杂质分子去除，以免对抗体造成竞争性反应，(比如甘油，甘氨酸，BSA 等)；
2) 将预处理好的磁珠10 mg 放入偶联反应瓶中，加入100 uL 偶联液，然后加入250 ug-500 ug 的抗体（这是最少用量，加入更多的抗体能达到更好的偶联效果，我们推荐磁珠量mg：抗体量mg=20:1）；
3) 偶联反应：将偶联反应瓶拧紧放入恒温摇床中，保证恒温25 度，震荡6 小时，保证磁珠分散，防止磁珠沉淀或者挂壁。（可以将偶联反应时间适当延长到12 小时达到更好的偶联效果）；
4) 封闭：向偶联反应瓶中加入200 uL 封闭液，放入恒温摇床，25 度，震荡6 小时，以封闭掉没有反应的活性基团；
5) 偶联后磁珠的处理：对偶联结束后的磁珠，必须要去除表面的非特异性结合和非共价键结合，分别用1 mL 偶联液和淋洗液，交替淋洗磁珠，磁液分离后，重复二次，以保证没有自由游离的配体；
6) 磁珠的保存：用1 mL 保存液淋洗磁珠，磁液分离后，重复一次，最后用保存液配制所需的磁珠浓度中，于4 度保存。
注意事项：
1. 此操作方法可用于偶联单克隆抗体或其他蛋白质。如果配体是氨基酸或者带有氨基、巯基、或羟基的小分子化合物，可以溶解在偶联液中偶联；
2. 禁止使用带有氨基、巯基的缓冲盐作为缓冲液使用，比如：Tris。