BTN130621 Taq DNA连接酶

Taq DNA连接酶说明书
产品编号：BTN130621
规格：1000U
产品及特点：
Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对，并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此，可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内，Taq DNA 连接酶均有活性。它具体有下列特点：
1. 耐热性好。
2. 可在 PCR 和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸。
3. 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测。
4. 可通过PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变。
5. 10×Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD+来作为Taq DNA 连接酶辅因子。
规格及成分：

成分	规格
Taq DNA 连接酶（40 U/μL）	25μl
10×Taq DNA 连接酶反应液	1.5ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：
DNA、超纯水
使用方法：
以50 μL 反应体系为例，按照下表分别加入DNA、酶以及反应液等。

DNA	X（1 ug DNA）
10×Taq DNA 连接酶反应液	5μl
Taq DNA 连接酶（40 U/μL）	2μl
超纯水	补足到50μl

将各成分混匀后在45℃下反应15 分钟。终止反应：加入染料（含有50%甘油、50 mM EDTA 和溴酚蓝），70℃下反应10 分钟，然后在0.7%琼脂糖凝胶中电泳。
相关资料：
本产品来源：
纯化自重组 E. coli 菌株，含有自 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因。
单位定义（粘性末端活性单位）：
1 单位指在 50 μL 反应体系中，45℃ 反应条件下，15 分钟能使 50%的 12 bp 粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12 bp 粘性末端来自于经 1μg BstEII 消化后的 λDNA。
贮存液成分：
50 mM KCl，10 mM Tris-HCl（pH 7.4），0.1 mM EDTA，1 mM DTT，200 μg/ml BSA，50% 甘油。