热敏磷酸酶说明书
产品编号：BTN130655
规格：500U
产品及特点：
本产品是从南极微生物中克隆并在大肠杆菌中表达的热敏磷酸酶，它能催化除去DNA 或RNA末端的5′磷酸基团。由于磷酸酶处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5′磷酸末端，因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。本产品具有下列特点：
1. 除去DNA、RNA、rNTPs和dNTPs 5'末端的磷酸基团。
2. 防止克隆载体的自连接。
3. 蛋白质丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的去磷酸化。
4. 为5'末端标记准备模板。
5. 去除PCR产物中的dNTP和焦磷酸盐。
6. 无核酸内切酶、外切酶、RNase污染，SDS-PAGE电泳经考马斯亮蓝染色检测其纯度大于95%。
7. 70℃加热5分钟可使酶完全失活。
规格及成分：

成分	规格
热敏磷酸酶，5000U/mL	500U
10×热敏磷酸酶反应Buffer	1ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
载体去磷酸化实验举例：
1. 限制性内切酶酶切1-5μg载体DNA，向内切酶反应Buffer 中加入1/10体积的10×热敏磷酸酶反应Buffer。
2. 加入1μL热敏磷酸酶（5U），混匀。
3. 5'末端或者平末端于37℃温育15分钟，3'末端于37℃温育60分钟。
4. 70℃温育5分钟热失活（或者按照限制性内切酶的要求失活）。
5. 进行连接反应。