DNase I溶液说明书
产品编号：BTN130984
规格：1.5ml
产品及特点：
DNase I全名是Deoxyribonuclease I，中文名称是脱氧核糖核酸酶I。它从牛胰腺纯化得到是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶，分子量约32kDa（单体）。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5'端为磷酸基团，3'端为羟基。其活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。本产品是DNase I的10mg/mL的溶液，酶活性为1500-2500U/mg，它具有下列特点：
1. 即开即用，不需要用户单独配置。
2. 可用于制备RNase-free的DNase。本产品为粗制品，可能含残留的RNase，不能直接用于清除RNA样品中的DNA。
3. 本产品可直接用于DNase I Footprinting实验、缺口平移（Nick Translation）、制备DNA随机片断文库、制备TUNEL检测中的阳性对照。
规格及成分：

成分	规格
DNase I溶液（10mg/mL）	1.5ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输、-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
本产品可用于DNase I Footprinting实验、缺口平移（Nick Translation）、制备DNA随机片断文库、TUNEL检测中剪切基因组DNA作为阳性对照。具体使用方法请参考相关资料。
注意：本产品浓度较高，如需对其进行稀释，需要自备DNase I储存液。
DNase I储存液的配方是：50mM Tris-acetate（pH 7.5），10mM CaCl2，50%（v/v）甘油。
附录：
1. DNase I活性定义：37℃10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
2. DNase I活性检测条件：40mM Tris-HCl（pH8.0），10mM MgSO4，1mM CaCl2，1μg of pBR322 DNA。
3. 纯度：不含其它DNA内切酶和外切酶。
4. DNase I酶储存溶液：50mM Tris-acetate（pH7.5），10mM CaCl2，50%（v/v）甘油。
5. DNase I酶反应液（10×）：100mM Tris-HCl（pH7.5 at 25℃），25mM MgCl2，1mM CaCl2。
6. 失活或抑制：加入EDTA至终浓度为2.5mM后，65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1%的SDS、DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。