BTN130989 白细胞裂解液

白细胞裂解液说明书
产品编号：BTN130989
规格：100ml
产品及特点：
本产品为即用型白细胞裂解溶液，可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞，用于DNA提取、RNA提取等后续实验。
规格及成分：

成分	规格
白细胞裂解液	100ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：
Tris饱和酚、氯仿、乙酸钠溶液、乙醇、TE缓冲液等。
使用方法：
下面以DNA提取为例：
1. 取新鲜抗凝血5 mL，在10 mL或15 mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞（红细胞裂解液有几种配方，用户需要根据所选产品的使用手册进行操作，这里不列出每种的详细步骤），也可以直接2500 rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10 mL或15 mL的塑料离心管中。
2. 在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2 mL。
3. 加1 mL的本产品，混匀后55℃ 保温3小时，其间轻轻振摇数次。
4. 加入3 mL 自备的Tris饱和酚，轻轻震摇5分钟，使得水相和酚相充分分开。
5. 3500 rpm离心15分钟，上层水相含DNA，中间白色层为蛋白质，下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10 mL或15 mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤，直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8. 在上清液中加入等体积的自备的氯仿，轻轻震摇5分钟，3500 rpm离心5分钟，转移上清液到一干净的10 mL或15 mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9. 在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸钠溶液（pH 5.2）和2倍体积的无水乙醇，轻柔颠倒混匀，将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来，转移到1.5 mL的塑料离心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11. 转移DNA沉淀到一个1.5 mL的塑料离心管中，空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后，加入0.5 mL自备的TE缓冲液溶解DNA，4℃放置待用。