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公司新闻

BTN131289 PLP固定液(Nakane-McLean固定液)

发布时间:2017-10-03 17:34 |  点击次数:

PLP固定液(Nakane-McLean固定液)说明书
产品编号:BTN131278
规格:250ml
产品及特点:
PLP 固定液即过碘酸钠- 赖氨酸- 多聚甲醛固定液(Periodate–Lysine-Paraformaldehyde Fixative),又可称为Nakane-McLean 固定液。该固定液的作用机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构成,抗原决定簇位于蛋白部分,故该固定液有选择性地使糖类固定,这样既稳定了抗原,又不影响其在组织中的位置关系。本产品具有下列特点:
1. 较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
2. 即开即用,用户不需单独购买各种试剂来配制。
3. 固定时间一般需要12-24小时。
格及成分:

成分 规格
溶液A 240ml
溶液B 80ml
成分C 1g
明书 1份
保存条件:
常温运输,4℃避光保存,保存期限半年。
自备试剂:
20%甘油或0.1 M PBS 溶液。
使用方法:
一、配制PLP 固定液(以配制50 mL 固定液工作液为例,如果用户需要配制其他体积,请按比例增加或减少各成分的用量)
1. 取 30 mL溶液A 加入到50 mL的聚乙烯离心管中。
2. 继续向离心管中加入10 mL的溶液B,混合均匀。
3. 称取 0.085g成分C的干粉,加入到上步混合液中,搅拌直至干粉溶解,即得到PLP固定液工作液。
注:此固定液最好临用前配制,否则时间长了会产生一些沉淀,亦会发生氧化反应,从而影响后续组织固定实验。
二、固定液的使用(以皮肤活组织切片为例)
4. 取皮肤活组织,切成小长方块。
5. 置入 PLP 固定液工作液中,固定12-24 小时(根据样品材料、大小不同,固定时间或固定温度可能会有较大差异)。
6. 用 0.1 M 自备的PBS 溶液漂洗固定后的组织样品。
7. 将样品置于自备的 20%甘油或0.1 M PBS 溶液中,4℃下保存过夜。
8. 将上述样品转移至-20℃下保存备用(20%甘油或0.1 M PBS 溶液应淹没组织样品,以防组织样品暴露在液面外被冻伤),或用冷冻的滑动式切片机将固定后的组织样品切成薄片,光镜或电镜下观察组织。
注意事项:
1. 本产品对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2. 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3. 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于 10:1。温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4. 固定后的组织样品在转移到-20℃下保存之前,4℃下最长可保存1 周。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。