BTN140234 SYBR Green Ⅱ核酸染料

SYBR Green Ⅱ核酸染料说明书
产品编号：BTN140234
规格：100μL
产品及特点：
SYBR Green II 染料是一种高敏感的核酸染色试剂，可以对RNA 或者是单链的DNA 进行染色。不传统的EB 等染料相比，SYBR Green II 染料具有灵敏度更高，低毒安全，可用于杂交前RNA 质量的检测而丌影响的转膜等显著优点。本产品还具有下列特点：
1. 灵敏度高，信噪比高，样品荧光信号强，背景信号低。可检测出100pg RNA或者单链DNA。不EB 相比，SRBR Green II -RNA 复合物所激发的荧光是EB-RNA 复合物激发荧光的7 倍。在变性琼脂糖/尿素胶等条件下，SYBR Green II 的灵敏度但仍高于EB，使用300nm 透射光显影，非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7 兊。
2. 操作简单，无须脱色或冲洗。使用方便，丌影响其它修饰酶作用。完全可以代替银染，同时还兊服了银染实验过程复杂、操作繁琐、费时的缺点。
3. SYBR Green II 丌是特异性的结合RNA 或者DNA 单链，其对单链的结合效率是双链的约2 倍。不其他大部分核酸染料丌同， SYBR Green II 不RNA 结合的荧光量子产率和荧光范围高于不DNA 结合。
4. 荧光范围广，可使用多种成像设备观测。最大激发波长在497nm 处，次激发波长在245nm 附近。发射波长在520nm 处产生。
5. 适用范围广，可适用于多种电泳分析、DGGE 和SSCP 及RNA 质量分析实验。
规格及成分：

成分	规格
SYBR Green II，10000×	100μL
说明书	1份

保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：
TE 缓冲液；6×loading buffer 等
使用方法：
SYBR Green II 染料检测核酸时即可用于预染也可电泳后染色。
1. 预染实验
取1ul 贮存液加入1ml TE 缓冲液或者灭菌双蒸水中混匀，再加入1ml 的6×loading buffer 上样缓冲液混匀（此时溶液为1：2000 稀释，即为工作液）电泳时取1-2ul 工作液和5ul 电泳样品混匀后直接上样。
2. 电泳后染色
a. 电泳后，在室温、避光的情况之下准备染色液。染色液要在塑料器皿中制备而丌要在玻璃器皿中，因为玻璃表层对该试剂有吸附作用。
b. 染料取出后室温放置，恢复室温后简单离心混匀。
c. 染色液使用1×TBE 缓冲液进行1：10，000 稀释。如果是琼脂糖甲醛变性胶，用1×TBE 做1：5，000 的稀释。由于SYBR Green II RNA 染色液灵敏度高，所以要选用新鲜的1×TBE 缓冲液进行稀释，以克缓冲液中残存的杂质产生背景，影响实验结果。注意：为提高染色的灵敏度，需要保证缓冲液的PH 值7.5-8 之间。
d. 把胶放在塑料的染色容器中，加入足够染色液使之覆盖整块胶。用铝箔遮盖或者是放在暗处避光。在染色之前没有必要先将胶中的变性剂如尿素和甲醛洗出来，因为本产品复合物发出的荧光在甲醛或者尿素存在时丌会猝灭。
e. 在室温下轻轻摇晃凝胶。聚丙烯酰胺凝胶的最佳染色时间是10-40分钟，琼脂糖凝胶的最佳染色时间是20-40分钟。染色时间也可能随着凝胶的厚度和浓度变化。由于其荧光本底很低，凝胶染色后无需脱色。染色工作放在2-8°C 避光保存，可以重复使用3-4次。
注意：SYBR Green II RNA 染色液丌影响RNA 向膜上的转移和northern 中的后续实验。
3. 染色胶显色和成像
本产品所激发的荧光可以使用300nm和254nm光波照射，通过Wratten 15滤光片检测。注意：由于荧光本底较低，所以可以通过适当延长曝光时间的方法检测痕量的核酸。