乙酰胆碱酯酶染色液(亚铁氰化铜法)试剂盒说明书
产品编号：BTN160681
规格：2×50ml
产品及特点：
胆碱酯酶（cholinesterase，ChE）属于特异性酯酶，可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶（Acetyl cholinesterase，AChE）又称为真性胆碱酯酶，能水解乙酰胆碱，起到生理的调节作用；另一类为胆碱酯酶，又称假性胆碱酯酶（Pseudo cholinesterase，PsChE），能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。AChE 主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处；PsChE 主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内。
本产品的染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱，释放乙酸和硫代胆碱。硫代胆碱中的硫氢基(-SH)把铁化钾还原为亚铁化钾，后者与铜离子结合形成不溶性的红棕色至深棕色的亚铁氰化铜沉淀在酶活性部位而显示出来。本产品特点如下：
1. 操作简单、酯酶的扩散较少。
2. 可用于观察中枢神经和周围神经纤维等疾病情况下的改变。
3. 有机农药中毒时可使该酶受到抑制，酶的活性下降而呈阴性反应。
规格及成分：

成分	规格
成分A1	25mg
溶液A2	5ml
溶液A3	35ml
溶液A4	5ml
溶液A5	5ml
溶液A6	1ml
溶液B	50ml
溶液C	1ml
说明书	1份

保存条件：
低温运输，4℃避光保存（其中溶液A2 需常温保存，溶液A6 需-20℃避光保存），有效期半年。
自备试剂：
10%甲醛钙固定液（BTN131276）从我公司另购。
使用方法：
1. 冰冻切片，厚6 μm，不固定或置于遇冷的10%甲醛钙固定液中固定10分钟。
2. 蒸馏水洗 3 次，每次1分钟。
3. 配制溶液 A 混合液：临用前，取A2 加入A1 中，使后者完全溶解，得到A12 混合液。取适量的溶液A12 混合液、溶液A3、A4、A5、A6，按1：7：1：1：0.2 比例充分混匀，即可得到溶液A 混合液，6 小时内使用。
注：如果想显示AChE 和ChE，即无需区分AChE 和ChE，无需加入溶液A6。
4. 切片加入到预温的配制好的溶液A 混合液中，37℃避光孵育1～3 小时（一般不超过6 小时），至切片呈淡棕色时取出。
5. 蒸馏水冲洗，镜下观察如活性部位仍较淡，可于蒸馏水洗后再进行孵育，至反应合适为止。
6. 流水冲洗 5分钟。
7. 滴加溶液 B 浅染细胞核3～5分钟。
8. 流水冲洗 10分钟。
9. 常规脱蜡透明，中性树胶封固。
10. 染色结果：AChE 酶活性部位为红棕至深棕色，细胞核为蓝色。
阴性对照（可选步骤）
取配置好的溶液A 混合液，按溶液A 混合液：溶液C=50：1 比例充分混匀得到溶液AC 混合液。取相同切片加入溶液AC 混合液中，其余操作同上，染色结果呈阴性反应。
注意事项：
1. 本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。