BTN140385 农杆菌LBA4404感受态细胞

农杆菌LBA4404感受态细胞说明书
产品编号：BTN140385
规格：0.1ml×10
产品及特点：
本产品为LBA4404农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和链霉素抗性，适用于玉米、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达10³cfu/μg。
规格及成分：

成分	规格
农杆菌LBA4404感受态细胞	0.1ml×10支
说明书	1份

保存条件：
干冰运输、-80℃保存，有效期一年。
自备试剂：
质粒DNA、液氮等
使用方法：
转化前准备
1.冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3.将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1.取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2.无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3.将离心管置于液氮中速冻5分钟（注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮）。
4.迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5.加入800 μL无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6.5000rpm离心1分钟收菌，保留100μL左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。