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公司新闻

BTN150801 大肠杆菌BL21 Star(DE3)感受态细胞

发布时间:2017-10-03 17:41 |  点击次数:

大肠杆菌BL21 Star(DE3)感受态细胞说明书
产品编号:BTN150801
规格:0.1ml×10
产品及特点:
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株,由特殊工艺制作,使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107cfu/μg。
BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有rne131 基因突变体。rne131 突变基因能够增强菌株细胞内mRNA 的稳定性,从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于T7 启动子表达载体(如pET 系列)的高水平蛋白表达。
菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm rne131(DE3)。
格及成分:

成分 规格
大肠杆菌BL21 Star(DE3)感受态细胞 0.1ml×10
说明书 1份
保存条件:
干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:
目的DNA、LB 培养基等。
使用方法:
1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100 μL 感受态细胞为例。
2. 取 100μL 冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25 分钟。
3. 42℃水浴热激45 秒,迅速放回冰上并静置2 分钟,晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700μL 不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后37℃,200rpm 复苏60 分钟。
5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相应抗生素的LB 培养基上。如果转化高浓度的质粒,可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。